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細菌生化試驗—賴氨酸鐵瓊脂試驗

張輝
錄入時間:2018-3-23 9:14:41 來源:青島海博生物

一、試驗原理:

賴氨酸鐵瓊脂培養基中,蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;溴甲酚紫為pH指示劑;瓊脂作為凝固劑。

培養基用于同時檢測腸桿菌科細菌的賴氨酸脫羧酶和產硫化氫試驗特別用于檢測沙門氏菌和亞利桑那菌。

二、培養基

 蛋白胨   5.0 g
 酵母浸膏   3.0 g
 葡萄糖   1.0 g
 鹽酸L-賴氨酸   10.0 g
 硫代硫酸鈉   0.04 g
 檸檬酸鐵銨    0.5 g
 溴甲酚紫   0.02 g
 瓊脂   15.0 g
    1000.0 mL

 

以上各成分(溴甲酚紫除外)加熱溶化于水中,調至pH 6.7 ± 0.2,加入溴甲酚紫,混合均勻,分裝于100*13mm小試管中,每管4mL116℃滅菌15min,制成深底層短斜面(斜面長2.5cm底部長4cm),凝固備用。本培養基可再添加精氨酸10.0 g,即制成賴氨酸精氨酸鐵瓊脂斜面,用于耶爾森氏菌的鑒別。

三、試驗方法

以接種針挑取純培養物或菌落穿刺接種達管底,并涂劃于斜面,于36±1℃培養18-24h,觀察試驗結果。

四、試驗結果判斷:

質控菌株

菌株編號

生長情況

質控結果

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC 14028

+++

斜面紫色,底層紫色,產硫化氫

亞利桑那沙門氏菌

CMCC(B) 47001

+++

斜面紫色,底層紫色,產硫化氫

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

+++

斜面紫色,底層紫色,不產硫化氫

五、說明:

若與三糖鐵瓊脂培養基聯合使用,在初步生化鑒定中會有很大助益。

 

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