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幾種常見的微生物酶類實驗

楊永帥
錄入時間:2018-3-30 13:41:16 來源:青島海博生物

自然界中的很多微生物都具有產酶的特性,其中最常見的四種分別是過氧化氫酶、氧化酶、凝固酶和DNA酶。下面就這四種酶的檢驗方法做一下介紹。

1、過氧化氫酶實驗

    很多細菌都可以產過氧化氫酶,過氧化氫酶能夠催化過氧化氫,釋放出氧氣,從而產生氣泡。檢驗方法是取3%過氧化氫溶液0.5ML,滴加于不含血液的細菌瓊脂培養基上,或者取1-3ML滴加到10ML的菌懸液中。如果培養物中出現氣泡則為陽性。做過氧化氫酶實驗時要注意以下幾點:1、細菌要新鮮。2因為紅細胞中含有過氧化氫酶,可能出現假陽性,所以不能用血瓊脂平板做過氧化氫酶實驗。

2、氧化酶實驗

    具有氧化酶的細菌,能夠氧化對苯二胺,生成有色的醌類化合物。檢驗方法是取潔凈的濾紙一小塊,涂抹菌苔少許,滴加一滴10g/L對苯二胺溶液于菌落上,觀察顏色變化。如果立即呈粉紅色并迅速轉為紫紅色者為陽性。做該類實驗應注意不能采用在含葡萄糖培養基上生長的菌落,因為葡萄糖發酵可抑制氧化酶的活性。

3、凝固酶實驗

    金黃色葡萄球菌可產生游離的凝固酶,從而使血漿凝固。檢驗方法是取兩支試管,分別加入0.5ML血漿(可適當稀釋),挑取菌落加入到試管中,用已知的陽性菌株作為對照,37攝氏度下水浴3-4小時。血漿凝固者為陽性。

4. DNA酶實驗

    某些細菌可產胞外DNA酶,DNA酶可以水解DNA長鏈,形成的寡核苷酸可溶于酸,當在菌落平板上加入酸后,若在菌落周圍出現透明環,則表明該菌具有DNA酶。檢測方法是將待檢菌落點狀接種于DNA瓊脂平板上,35攝氏度培養18-24小時,在細菌生長物上加一層1MOL/L鹽酸(使菌落浸沒),如果菌落周圍出現透明環則為陽性,無透明環為陰性。需注意的是革蘭氏陽性菌中只有金黃色葡萄球菌可產生DNA酶,因此此方法可用來鑒定金黃色葡萄球菌。

 

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